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  • 胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異有哪些

    2021-09-26 胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清,因其未與外界環境接觸,所以血清內IgG等免疫因子相對含量較少,適合用于免疫類細胞的培養。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先,胎牛血清總蛋白含量(g/dl)約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個血清是否為胎牛或新生牛血清,蛋白含量越高說明牛齡越大,目前檢測蛋白含量是初步檢測一項重...
  • 常見的細胞轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染

    2021-08-29 細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72小時內(依賴于各種不同的構建)分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫...
  • 一文帶你了解關于細胞增殖的知識

    2021-08-27 一、什么是細胞增殖細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義:細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一,是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式:真核生物的分裂依據過程不同有三種方式,有有絲分裂,無絲分裂,減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
  • 預染蛋白Marker和未預染蛋白Marker有哪些不一樣

    2021-07-27 在Western實驗中,蛋白Marker可以監控蛋白質在SDS-PAGE中的遷移,監控蛋白的轉膜效率,確定蛋白分子量大小。選擇正確的蛋白Marker是westernblot實驗成功的條件之一。蛋白Marker分為兩種:一種是未預染的Marker,即寬分子量蛋白標準,高分子量蛋白標準及低分子量蛋白標準;另一種是預染的Marker,即單色預染和多色預染。一、未預染蛋白Marker未預染的蛋白Marker是簡單,也是最準確的一種,由于沒有附帶染料分子或者標記大小正好是蛋白原本的大小...
  • 如何避免胎牛血清使用時出現黑點

    2021-06-27 在細胞培養過程中,經常加入5%-20%的Gibco胎牛血清,最常使用的Gibco胎牛血清濃度是10%。高濃度的血清可能改變細胞的基因表達譜,影響后續實驗的結果,我們在實驗中使用10%的Gibco澳洲胎牛血清培養293T細胞,效果非常好。但是有些細胞也會使用5%的Gibco胎牛血清或者20%的Gibco胎牛血清,要根據具體細胞選擇合適的Gibco胎牛血清濃度。為防止客戶由于操作方面而使黑點生成的辦法。對此一定要做好以下幾點。方可使細胞培養順利。(1)盡可能地減少血清凍融次數。(...
  • 這樣做能防止胎牛血清產生沉淀

    2021-05-30 沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產品性質。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。如何避免胎牛血清中產生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產生:(1)解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。(2)血清分裝凍...
  • 帶你了解細胞凋亡檢測試劑盒的知識

    2021-04-19 細胞凋亡是細胞的基本特征之一,它在機體的胚胎發育、組織修復、內環境的穩定等方面起著十分重要的作用。形態學檢測是研究細胞凋亡的基本方法。細胞凋亡的形態學變化是多階段的,起初,細胞間連接和微絨毛消失,細胞體積縮小,胞漿凝縮,內質網變疏松并與胞膜融合,形成一個個空泡,核糖體與線粒體等細胞器聚集,結構尚無明顯改變,細胞核內的染色質逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊,細胞核固縮呈均一的致密物,進而斷裂成碎塊,此時細胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不斷出芽、脫落,一個細胞變成數個大小不等的有膜...
  • 液體培養基接種要注意的事項有哪些

    2021-02-24 液體培養基,固體培養基的對應詞,是微生物或動植物細胞的液狀培養基。它具有進行通氣培養、振蕩培養的優點。在靜止的條件下,在菌體或培養細胞的周圍,形成透過養分的壁障,養分的攝入受到阻礙。由于在通氣或在振蕩的條件下,可消除這種阻礙以及增加供氧量,所以有利于細胞生長,提高生產量。液體培養基接種要注意的事項有哪些:①用酒精棉消毒操作臺面。將移液器吸頭盒放入酒精燈右側,靠近酒精燈放置。將需要進行液體轉接的試管插在試管架上,置于酒精燈左邊左手附近。將移液器調至合適的刻度放于右手附近的架子上...
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